Cell culture protocol

【Experimental Principle】 The main difference between cell culture technology and other general laboratory work is the requirement to maintain aseptic operation,Avoid the influence of microorganisms and other harmful factors。A general standard cell culture chamber should include a preparation chamber、Preparation room and culture room。The three chambers are both interconnected and relatively independent,Each completes different operations in the culture process。 【Objective】 (1) Understand the setting and equipment of the culture room。 (2) Learn the concept of aseptic and the essentials of aseptic operation。 【Operation Steps】 1. Laboratory Setup (1) Preparation Room (2) Preparation Room (3) Culture Room The culture room should be completely closed,Maintain a constant temperature,The following points should be paid attention to in the design: (1) The location of the culture room is best located on the shaded side,Places where direct sunlight cannot be reached,Prevent the indoor temperature from rising。 (2) The height of the ceiling should not exceed 2 meters,In order to ensure the effective sterilization effect of the UV lamp, (3) The door is generally sliding door,to prevent air movement。 (4) Ceiling、The floor and surrounding walls should be smooth and free of dead corners,To tile or paint,It's designed like this,First, it is easy to clean and disinfect,In addition, it is not easy to accumulate dust in the corners of the wall。 2Commonly used laboratory equipment: (1) Preparation room equipment, (1) Double distilled water retort:Prepare double distilled water。 (2) Acid tank:Hold lotion,Soak glassware。 (3) Oven:Washed glassware is oven dried。 (4) Pressure cooker:glassware、Dissecting utensils、Partial liquid、Sterilization of plastic utensils, etc。The effective sterilization pressure and time are different for different items。 (5) Locker 1:Place unsterilized items。 (6) Locker 2:Place sanitized items。 (7) Packing table:For packaging before sterilization。 Preparation room precautions: (1) Prevent the still from being roasted dry。 (2) Water seeping out from the placed pool。 (3) Do not splash acid on clothing or the ground。 (4) Do not block the pressure cooker exhaust valve and safety valve。 (5) Sterilized items should be stored separately from unsterilized items。 (2) Equipment of the liquid preparation chamber (1) Balances (torque balances and electronic balances):Weigh (2) pH meter: (3) Magnetic stirrer: (3) Equipment of cell culture room (1) Ultra-clean workbench: There are many types of clean benches,There is a one-sided single、Single-sided double、Double-sided double or double-sided quadruple, etc,It works by utilizing a blower,Enables the air to pass through highly efficient air filtration,Slowly pass through the countertop,This results in a sterile and homogeneous air in the working environment。 Depending on the laminar flow method,Ultra-clean workbenches are mainly divided into two types: horizontal laminar flow type and vertical laminar flow type,The rationale is much the same,The indoor air is initially filtered through a coarse filter,It is pressed into the static pressure box by a centrifugal fan,Then pass through the high-efficiency air filter,The resulting clean air flow passes through the sterility at a certain uniform cross-sectional velocity,So as to form a dust-free and sterile high-cleanliness working environment。However, the direction of the airflow is different between the two types of stations。 There are several issues that should be paid attention to when using a clean bench: A. The purification workbench is best installed in a dust-free room,It is best to be in a well-isolated sterile room,In order to avoid excessive dust, the filter will be easily blocked,Reduces the purification effect,Shorten the service life。 B. Newly installed or long-term unused workstations,The workbench and surroundings must be cleaned with a vacuum cleaner or a tool that does not produce fibers before work,Then use drug sterilization or ultraviolet sterilization for sterilization。 C. Every time the workbench is used,The countertop should be scrubbed with 75% alcohol first,And treat the microorganisms accumulated in the purification work area with 30~50min ultraviolet sterilization lamp in advance。After turning off the UV lamp, the blower should be started and let it run for two minutes before the incubation operation。 D. Unnecessary items should not be stored in the purification work area,to keep the clean airflow pattern undisturbed。 E. Generally,The HEPA filter is replaced every three years。Replacing the high-efficiency filter should be operated by a professional,to keep the seal well。The coarse filter should be removed and cleaned regularly,The time should be determined according to the cleanliness of the environment,It is usually done every 3~6 months。 F. Every time you use the purification table, you should remove the items on the work surface in time,And scrub the countertop with sprinkler to keep it clean at all times。 (2) 4 °C freezer and low temperature freezer: (3) CO2 incubator: A. A concentration of CO2 on cell growth,In particular, primary culture and single-cell culture have a facilitating effect (5%)。 B. A certain concentration of CO2 can maintain a constant pH of the culture medium。Suitable for open cultures,After the incubator is sealed,It can be cultivated in a general incubator,However, when using Petri dishes or multi-well plates,Air with high humidity and high CO2 content is required。 C. It increases humidity,The box is equipped with a water bath,Humidity in the incubator can be guaranteed。 D. The incubator is equipped with a UV lamp。 E. The ratio of CO2 to air can be adjusted by means of a gas flow meter。 F. Preservatives (dioxacetic acid) can be added to the water。It can prevent high humidity in the CO2 incubator,Prone to mold。 (4) Ozone generator: (4) Centrifuge: (5) CO2 cylinders: (6) Liquid nitrogen tank: (7) Lockers:Used to store sundries (8) UV lamps: (9) Air purification system (10) Inverted microscope 3. Aseptic operation (1) Sterilization of the clean room: (1) The ultraviolet lamp should be turned on when no one is there; (2) Wear a sterile gown when entering the sterile room、Wear a hat and mask; (3) Clean and disinfect once a week; Read More …

上海合作组织青岛峰会举行习近平主持会议并发表重要讲话

强调要进一步弘扬“上海精神” 构建上海合作组织命运共同体 6月10日上海合作组织成员国元首理事会第十八次会议在青岛国际会议中心举行国家主席习近平主持会议并发表重要讲话新华社记者 李学仁 摄 上海合作组织成员国元首理事会第十八次会议10日在青岛国际会议中心举行中国国家主席习近平主持会议并发表重要讲话上海合作组织成员国领导人常设机构负责人观察员国领导人及联合国等国际组织负责人出席会议与会各方共同回顾上海合作组织发展历程就本组织发展现状任务前景深入交换意见就重大国际和地区问题协调立场达成了广泛共识。 6月的青岛风景如画国际会议中心外碧海蓝天与会各国国旗上海合作组织会旗和与会国际组织旗帜迎风飘扬上午11时许会议正式开始习近平在开幕辞中首先感谢各方一年来对中方担任上海合作组织主席国工作的大力支持和密切配合指出这次峰会是上海合作组织实现扩员以来举办的首次峰会具有承前启后的重要意义欢迎印度总理莫迪巴基斯坦总统侯赛因首次以成员国领导人身份出席峰会习近平随后发表题为《弘扬“上海精神” 构建命运共同体》的重要讲话习近平指出上海合作组织成立17年来走过了不平凡的发展历程取得了重大成就我们以《上海合作组织宪章》《上海合作组织成员国长期睦邻友好合作条约》为遵循构建起不结盟不对抗不针对第三方的建设性伙伴关系这是国际关系理论和实践的重大创新开创了区域合作新模式为地区和平与发展作出了新贡献。Today,上海合作组织是世界上幅员最广人口最多的综合性区域合作组织国际影响力不断提升已经成为促进世界和平与发展维护国际公平正义不可忽视的重要力量习近平指出上海合作组织始终保持旺盛生命力强劲合作动力根本原因在于它创造性地提出并始终践行“上海精神”主张互信互利平等协商尊重多样文明谋求共同发展当今世界国际关系民主化已成为不可阻挡的时代潮流安全稳定是人心所向合作共赢是大势所趋不同文明交流互鉴是各国人民共同愿望我们要进一步弘扬“上海精神”提倡创新协调绿色、opening、共享的发展观践行共同综合、cooperate、可持续的安全观秉持开放融通互利共赢的合作观树立平等互鉴对话包容的文明观坚持共商共建共享的全球治理观破解时代难题化解风险挑战。 6May 10th,上海合作组织成员国元首理事会第十八次会议在青岛国际会议中心举行国家主席习近平主持会议并发表重要讲话新华社记者 丁林 摄 习近平强调“上海精神”是我们共同的财富上海合作组织是我们共同的家园我们要继续在“上海精神”指引下同舟共济精诚合作齐心协力构建上海合作组织命运共同体推动建设新型国际关系携手迈向持久和平普遍安全共同繁荣开放包容清洁美丽的世界。 first,凝聚团结互信的强大力量我们要尊重各自选择的发展道路兼顾彼此核心利益和重大关切不断增强组织的凝聚力和向心力。 second,筑牢和平安全的共同基础我们要强化防务安全执法安全信息安全合作促进阿富汗和平重建进程未来3年中方愿为各方培训2000名执法人员强化执法能力建设。 third,打造共同发展繁荣的强劲引擎我们要促进发展战略对接推进“一带一路”建设加快地区贸易便利化进程中方将在上海合作组织银行联合体框架内设立300亿元人民币等值专项贷款。 fourth,拉紧人文交流合作的共同纽带我们要扎实推进教育科技文化旅游卫生减灾、media、环保青少年等领域交流合作未来3年中方将为各成员国提供3000个人力资源开发培训名额愿利用风云二号气象卫星为各方提供气象服务。 fifth,共同拓展国际合作的伙伴网络我们要强化同观察员国对话伙伴等地区国家交流合作密切同联合国等国际和地区组织的伙伴关系同国际金融机构开展对话为推动化解热点问题完善全球治理作出贡献习近平最后强调中方愿同各成员国一道本着积极务实友好合作的精神全面落实本次会议的共识支持下一任主席国吉尔吉斯斯坦的工作携手创造上海合作组织更加光明的美好未来印度总理莫迪哈萨克斯坦总统纳扎尔巴耶夫吉尔吉斯斯坦总统热恩别科夫巴基斯坦总统侯赛因俄罗斯总统普京塔吉克斯坦总统拉赫蒙乌兹别克斯坦总统米尔济约耶夫上海合作组织秘书长阿利莫夫上海合作组织地区反恐怖机构执委会主任瑟索耶夫阿富汗总统加尼白俄罗斯总统卢卡申科伊朗总统鲁哈尼蒙古国总统巴特图勒嘎联合国常务副秘书长阿明娜先后发言他们高度评价中方为推动上海合作组织发展所作贡献和在担任主席国期间所作工作积极评价上海合作组织接收印度巴基斯坦加入的重要意义各方一致表示将继续遵循“上海精神”不断巩固政治、safe、economy、人文等领域务实合作完善全球经济治理体系巩固和发展多边贸易体制在国际法准则框架内解决地区热点问题推动构建人类命运共同体“一带一路”倡议再次受到了广泛欢迎和支持会议发表了《上海合作组织成员国元首理事会会议新闻公报》《上海合作组织成员国元首关于贸易便利化的联合声明》《上海合作组织成员国元首致青年共同寄语》《上海合作组织成员国元首关于在上海合作组织地区共同应对流行病威胁的声明》。 6May 10th,上海合作组织成员国元首理事会第十八次会议在青岛国际会议中心举行国家主席习近平主持会议并发表重要讲话这是会前习近平同与会各方在迎宾厅集体合影新华社记者 高洁 摄 会前习近平同与会各方在迎宾厅集体合影丁薛祥杨洁篪王毅何立峰等参加会议(记者 余孝忠朱超)

全面推行“双随机、1. Public" supervision

6月6日的国务院常务会定了这3件大事部署在市场监管领域推进管理方式改革和创新全面推行“双随机、1. Public" supervision;决定全面清理各类证明事项更多消除群众和企业办事烦恼确定进一步建设和完善社会信用体系的措施以诚信立身兴业。will be there,李克强总理作出了哪些部署? 部署在市场监管领域推进管理方式改革和创新 全面推行“双随机一公开”监管 会议指出落实《政府工作报告》要求全面推行“双随机一公开”市场监管方式随机抽取检查对象,Law enforcement inspectors are randomly selected,抽查情况及查处结果及时向社会公开,It is to deepen the reform of "delegating power, delegating power, delegating power, and improving services".、优化营商环境的重要举措。1.推动市场监管日常检查“双随机”方式全覆盖检查结果全部公开对有投诉举报等情况需要专项或重点检查的也要严格规范程序。2.加强顶层设计统一“双随机一公开”制度和流程整合各类市场监管平台。3.推进跨部门综合执法联合监管减少多头多层重复执法。4.提升基层执法能力完善考核和问责免责办法会议要求各有关部门都要推出有利于促进市场公平和效率的监管创新举措决定全面清理各类证明事项 更多消除群众和企业办事烦恼 会议决定顺应企业和群众呼声全面清理各类证明事项。1.对国务院部门规章和规范性文件等设定的证明事项可直接取消的要立即停止执行并抓紧修改或废止规章文件年底前先行取消申请施工许可证时需提交的资金到位证明等一批证明事项。2.对法律法规有规定但可通过法定证照书面告知承诺政府部门间核查等涵盖或替代的证明事项要提请修法依托信息共享和信用体系予以取消。3.对各地自行设定的证明事项除地方性法规规定外最晚应于年底前取消。4.各地区各部门要及时公布取消和保留的证明事项清单对确需保留的要逐项列明设定依据办理指南等清单之外政府部门公用事业单位和服务机构不得索要证明确定进一步建设和完善社会信用体系的措施 以诚信立身兴业 会议指出贯彻党中央、Decision-making and deployment of the State Council,近几年按照社会主义市场经济要求社会信用体系建设取得重要进展统一社会信用代码基本实现全覆盖守信联合激励和失信联合惩戒机制初步显威要坚持应用导向立法先行进一步加强社会信用体系建设。1.围绕优化营商环境加快构建以信用为核心的监管机制推广告知承诺制。2.建立黑名单制度强化信用约束对侵权假冒坑蒙拐骗虚假广告等违法违规行为要公开曝光坚决整治让失信者受到惩戒和震慑。3.坚决守住信息安全底线保护商业秘密和个人隐私。4.加快推进重点民生领域信用体系建设增进群众福祉。5.引导社会力量参与信用建设发展第三方征信服务强化政府部门诚信建设依法依规处理“新官不理旧账”问题。 This article is reproduced in::中国政府网 Read More …

2018网络市场监管专项行动(网剑行动)方案

为深入贯彻党的十九大精神落实国务院《“十三五”市场监管规划》按照高质量发展要求营造诚实守信公平竞争的网络市场环境网络市场监管部际联席会议各成员单位决定于5-11月联合开展2018网络市场监管专项行动(网剑行动)具体方案如下: One、总体目标 充分发挥网络市场监管部际联席会议作用融合整合各成员单位职能优势适应网络市场监管的新形势新任务新要求坚持依法管网以网管网信用管网协同管网优化监管方式,Enhance regulatory effectiveness。通过开展网剑行动以打击网络侵权假冒刷单炒信虚假宣传虚假违法广告等违法行为和落实平台责任规范格式合同为重点更好地实现对网络市场的全流程全链条精准监管进一步遏制网络市场突出违法问题提升网络商品和服务质量改善网络市场竞争秩序和消费环境推动社会信用体系建设。 Two、重点工作 (一)规范网络经营主体资格保障网络经营活动的可追溯性督促网络交易平台按照《网络交易管理办法》《网络食品安全违法行为查处办法》《网络餐饮服务食品安全监督管理办法》和《医疗器械网络销售监督管理办法》等规章要求登记备案并对平台内经营者的经营资格进行审查、check in、公示督促邮政企业快递企业加强对协议客户资格审查严格落实网络实名制加强网站备案IP地址域名等互联网基础管理严厉查处伪造企业名称冒用其他企业名称的非法主体网站和无证经营缺乏资质经营(市场监管总局、Ministry of Industry and Information Technology、邮政局药监局按职责分工协作) (二)严厉查处制售侵权假冒伪劣网络商品行为探索建立生产、circulate、消费全链条监管机制严惩生产销售不符合强制性标准的产品伪造产地厂名质量标志篡改生产日期在网售商品中掺杂掺假以假充真,Shoddy,或者以不合格商品冒充合格商品等违法行为根据商标权利人和消费者投诉举报媒体报道等以高知名度商标地理标志涉外商标老字号注册商标为重点从严从重打击侵犯商标专用权行为加强婴幼儿辅食等重点食品监管严厉查处网络销售假劣食品药品等违法犯罪行为在进出口和寄递环节加大对网络销售侵权和假冒伪劣商品的发现查处力度从生产源头流通渠道和消费终端进行全方位整治增强打击侵权假冒违法行为震慑力(市场监管总局、Public security、Customs、邮政局药监局知识产权局按职责分工协作) (三)整治互联网不正当竞争行为维护公平竞争的市场秩序以市场混淆等违法行为为重点推动执法办案工作着力治理网络失信问题严厉打击通过组织恶意注册虚假交易虚假评价合谋寄递空包裹等方式帮助其他经营者进行虚假或者引人误解的商业宣传从严处罚限制排斥平台内的网络集中促销经营者参与其他第三方交易平台组织的促销活动等行为(市场监管总局发展改革委邮政局按职责分工协作) (四)坚持正确宣传导向加大对网络虚假宣传虚假违法广告打击力度严肃查处网络上具有不良影响妨碍社会公共秩序和公序良俗的广告和信息加大对包括医疗、pharmaceuticals、foodstuff、保健食品等与人民群众生命财产安全密切相关的重点热点领域执法力度督促互联网平台加强自律规范商品或者服务的质量性能、Price、用途有效期限等宣传信息严禁以虚假或者引人误解的商品说明商品标准商品标价等方式销售商品或者服务全面加强网络安全监管遏制违法有害信息网上传播(市场监管总局、Public security、网信办药监局按职责分工协作) (五)规范网络合同格式条款严厉打击其他网络违法违规行为督促网络交易平台完善与平台内经营者消费者之间的格式合同修正不公平格式条款采用显著方式提请合同相对人注意与其有重大利害关系的格式条款认真及时查处混淆“定金”与“订金”不依法履行七日无理由退货义务自行解释“商品完好”以及在线旅游等网络服务交易平台经营者采用订金不退增加限退条件等方式侵害消费者权益的违法行为加大对未经同意收集、use,divulge、出售或者非法向他人提供消费者个人信息行为的处罚力度依法打击惩处窃取或者以其他非法方式获取出售或者向他人提供个人信息的犯罪行为严厉打击利用网络销售禁售物品和烟草制品以及未备案的单用途商业预付卡等关注规范新型消费业态模式尤其是保健食品生活信息服务等领域谨防其转变为网络欺诈网络传销等违法行为(市场监管总局、Public security、商务部按职责分工协作) 三具体要求 (一)突出问题导向精心组织部署各地区各部门要结合2017网络市场监管专项行动中发现的问题、2017年电子商务产品质量抽查结果本地消费投诉举报集中以及社会普遍关注的热点问题自选品类领域注重运用“双随机一公开”监管的原则和理念坚持规范与整治结合研究切实可行的具体实施方案关注网络市场突发热点问题回应社会关切适时开展宣传发布典型案例形成良好舆论氛围(二)依法依规开展强化联合执法充分发挥各地网监协作机制作用以侵犯商标专用权制售假冒伪劣商品提供刷单服务等违法行为为切入点依法查处网络交易违法行为强化网上发现源头追溯终端倒查线上线下共同治理建立健全线索通报证据移转案件协查大要案件挂牌督办等制度优化跨地域跨部门执法指挥协调联动机制畅通行政执法和司法衔接加大刑事打击力度(三)落实平台责任推进社会共治综合运用联合座谈、Interviews、告诫等手段强化网络交易平台等市场主体的“第一责任人”意识在平台治理信息披露公平竞争消费者权益保护广告合规知识产权保护食品安全等方面履行法定管理责任和社会责任积极协助配合行政机关监管执法充分发挥消费者和舆论的监督作用及时处理消费者投诉举报加大违法行为曝光力度努力构建社会共治新机制(四)提升技术水平优化监测监管充分运用全国12315互联网平台全国12358价格监管平台全国互联网广告监测中心电子商务产品质量风险监测中心、12365投诉举报处置指挥中心全国网络交易平台监管服务系统及各地相关平台、system,提高监管执法有效性完善ODR在线纠纷解决机制提高移动端互联网广告监测能力以及网络交易违法行为的应急处置能力加强与第三方机构合作关注网络集中促销期节假日等重要时间节点开展网络市场定向监测及时发现风险警示违法完善部门间信息交流反馈机制将碎片化的市场监管信息统一起来推动数据信息共享基础上的协同管网(五)健全信用体系推行全网警示推动网络交易平台平台内经营者物流企业等相关责任主体作出信用承诺,Accept social supervision。依托全国信用信息共享平台和国家企业信用信息公示系统将网络商品交易及有关服务经营者的基础信息和各部门履职中形成的行政许可行政处罚及其他监管执法信息归集记于企业名下通过“信用中国”网站和国家企业信用信息公示系统进行公示发挥部门失信联合惩戒作用实施全网警示引导涉网经营者诚信合法经营。 Four、进度安排 (一)动员部署阶段(5-6月)各地各部门要根据《2018网络市场监管专项行动(网剑行动)方案》要求,Unity,协同行动,保证机构改革期间网络市场监管工作的顺畅衔接。Combined with local realities,确定重点领域制定具体实施方案并于6月底前将实施方案报各上级主管部门(二)组织实施阶段(7-11月)各地市场监管部门要按照专项行动方案和具体实施方案牵头组织开展网剑行动突出重点问题强化源头治理督促指导生产企业和平台等网络经营者自查自纠和问题整改充分发挥网监协作机制各成员单位职能优势建立全链条监管机制逐级开展督导检查推动具体工作任务落实到位(三)督查总结阶段(10-11月)网络市场监管部际联席会议将从各成员单位各地各部门抽调人员组成联合督查组赴部分地方对2018网络市场监管专项行动(网剑行动)开展情况进行督查交流各地各部门要认真梳理专项行动工作情况总结经验做法分析问题成因研究解决对策巩固行动成果请各地各部门于12月13日前将本系统专项行动总结报告专项行动情况统计表典型案例(3件以上附行政处罚决定书)联合执法相关材料分别报各上级主管部门并抄送同级市场监管部门如遇重大情况请及时报告当地党委政府和各上级主管部门。  

Jiangsu Provincial Quality Supervision Bureau reported the results of sampling inspection of children's toys

Recently,江苏省质监局对儿童玩具产品质量进行监督抽查此次抽查儿童玩具涉及木制玩具毛绒玩具2种产品共74批次合格61批次合格率为82.4%抽查结果显示不合格项目为标识和使用说明塑料袋或塑料薄膜小零件3项指标。   注意寻找玩具包装上的警示信息 此次抽查发现11批次产品的标识不符合国家标准要求未按标准规定标明玩具适用年龄范围安全警示等信息质监部门提醒家长们要使用玩具安全标志作为指导在玩具包装上寻找警示信息或其他安全信息如年龄警示标特定危险的警示标制造商或销售商的名称及地址制造商或分销商的商标/标记对于无警示标识无品牌型号无适用年龄段标注无执行标准无使用说明的产品应避免购买。   玩具包装薄膜应远离儿童 对玩具中使用的无衬里的软塑料薄膜或软塑料袋在其外形最小尺寸大于100mm的情形下国家标准对塑料薄膜厚度和留孔作出了专门的技术规定防止儿童玩耍时被塑料薄膜掩住口鼻而造成意外伤害此次抽查发现3批次产品的塑料袋或塑料薄膜项目不合格玩具的包装袋或薄膜存在危险特别是不透气带绳索的包装袋打开玩具后要将包装薄膜等远离儿童。   防止儿童误吞玩具小零件 国家标准规定:36个月以下儿童使用的玩具及其可拆卸部件均不应完全容入小零件试验器;36个月及以上但不足72个月儿童使用的玩具及其可拆卸部件如能容入小零件试验器应设警示说明此次抽查发现2批次产品的小零件项目不合格存在玩具及其可拆卸部件被儿童吞入口中的风险在儿童使用玩具前家长们要仔细查看玩具是否存在小零件锐利的尖端或边缘孔及间隙等问题如果存在不要给儿童使用无论孩子年龄多大如果他们仍有啃咬物体的习惯都要确保玩具或玩具部件尺寸足够大不至于被孩子吞下塞住嘴或喉咙质监部门提醒给年龄较大孩子买的玩具也许不适合年龄较小孩子玩或对年龄较小孩子不安全给3岁以下孩子选择玩具尤其要谨慎不要买带有可能会被吞下或吸入的小部件的玩具包括小球体和未充气的气球以及那些带有尖或粗糙边缘的玩具。   儿童玩具产品质量监督抽查企业名单及结果.xls